Astrositlerin, fare beyni kesitlerinde ekstrselüler potasyum iyonlarını tamponlama fonksiyonlarının analizi

Abstract

Bu çalışmada, merkezi sinir sisteminde bulunan nöronların beslenmesi, beyin kan bariyerinin muhafazası ve ekstrselüler iyon homeostazında rol alan astrositlerin, aksiyon potansiyeli nedeniyle artan ekstrselüler potasyum iyonlarını temizlemesi yani, ekstrselüler potasyum iyonlarını tamponlama fonksiyonları analiz edildi. Yapılan çalışmalar sonucu elde edilen veriler yardımıyla tamponlama mekanizmasının karakteristiği oluşturulacaktır. Potasyum iyonlarının tamponlanmasının analizi için Patch-Clamp (Whole-Cell / Tüm Hücre) tekniği kullanıldı. Doğum sonrası 10 gün (P10) ile 30 gün (P30) yaş aralığında GFAP-EGFP (Glial Fibrillary Acidic Protein – Enhanced Green Fluorescent Protein) farelerden beyin kesitleri (300µm) alındı. Bu kesitlerde hipokampüs bölgesindeki stratum radiatumun CA1 bölgesindeki astrositlerin, uygulanan nöronal stimülasyon sonrası whole-cell patch clamp modunda kayıtları alındı. Patch Clamp kayıtları TIDA yazılımı aracılığıyla alınıp görüntülendi. Elde edilen veriler sonucu, astrositlerin depolarizasyonuna neden olan potasyum akımları tespit edildi. Astrosit, hipokampüs, stratum radiatum, patch clamp, TIDA.

Analysis of potassium buffering properties of astrocytes in mouse brain slices In this study, potassium buffering properties of astrocytes which have a critical role in CNS development (metabolism, regulation of volume and ion homeostatis of the interstitial space, and induction and maintenance of the blood brain barrier) were analyzed. The data obtained from this analyze will be used for the characterization of astrocytic potassium buffering mechanism. The Patch Clamp technique was used for the analyzis of the buffering mechanism of the astrocytes. The brain slices were taken from the GFAP-EGFP (Glial Fibrillary Acidic Protein – Enhanced Green Fluorescent Protein) mice (P10-P30). Hippocampal astrocytes which are located in CA1 region of stratum radiatum were recorded in whole-cell patch clamp mode simultaneously with neural stimulation. These patch clamp recordings are established and displayed by TIDA patch clamp software. With the data obtained from the experiments, potassium currents which caused a depolarization in the astrocytes were detected. Key Words: Astrocyte, hippocampus, stratum radiatm, patch clamp, TIDA.